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大鼠（Rat）纖維蛋白原（Fbg）ELISA檢測試劑盒【產(chǎn)品貨號】DM-F300【包裝規(guī)格】48/96T【用途】本試劑盒用于體外定量檢測[樣本類型，如：人血清、血漿、組織勻漿等]中的含量。僅供科研使用，不用于臨床診斷?！緳z測原理】試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被檢測指標(biāo)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的檢測指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。1 將抗體包被在酶標(biāo)板底部，加入待測抗原2 加入酶標(biāo)二抗放大信號3 捕獲抗體和檢測抗體分別結(jié)合抗原的不同表位，形成“抗體-抗原-抗體”的三明治結(jié)構(gòu)4 加入底物5 酶催化底物顯色，吸光度與抗原濃度成正比，適用于大分子抗原的定量檢測，如細(xì)胞因子、蛋白質(zhì)等【主要組成成分】組分名稱規(guī)格數(shù)量酶標(biāo)板96孔（包被抗體）1塊標(biāo)準(zhǔn)品[濃度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL]6瓶酶標(biāo)記抗體10mL1瓶底物溶液（TMB）10mL1瓶終止液（2M H?SO?）10mL1瓶濃縮洗滌液（20×）50mL1瓶樣品稀釋液30mL1瓶說明書-1份【儲存條件及有效期】試劑盒未開封時，于2-8℃避光保存，有效期為6個月。酶標(biāo)板需密封保存于2-8℃，避免受潮。【需要準(zhǔn)備的器材和試劑】1. 酶標(biāo)儀（450nm）2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱【操作步驟】1. 試劑準(zhǔn)備濃縮洗滌液：用蒸餾水或去離子水按1:20稀釋（如5mL濃縮洗滌液+95mL水），充分混勻。稀釋后的洗滌液在2-8℃可保存1周。標(biāo)準(zhǔn)品：根據(jù)說明書要求，用樣品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行梯度稀釋（具體稀釋方法見說明書附錄）。酶標(biāo)記抗體：使用前需室溫平衡30分鐘，若有沉淀，可輕輕混勻。2. 樣本處理按照常規(guī)方法采集和處理[樣本類型]，具體處理步驟如下：血清：全血樣本室溫靜置30分鐘，3000rpm離心10分鐘，取上清液。血漿：使用抗凝管采集血液，3000rpm離心10分鐘，取上清液。組織勻漿：取適量組織，按1:9比例加入PBS（pH7.4），冰浴勻漿，3000rpm離心10分鐘，取上清液。樣本需在-20℃保存，避免反復(fù)凍融，檢測前需室溫解凍并充分混勻，如有沉淀需再次離心。3.加樣將酶標(biāo)板從鋁箔袋中取出，平衡至室溫。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔。空白孔加50μL樣品稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)品孔分別加50μL不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加50μL待測樣本。輕輕震蕩混勻，37℃孵育30分鐘。4. 洗滌棄去孔內(nèi)液體，拍干。每孔加入200μL稀釋后的洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。5. 加酶標(biāo)記抗體除空白孔外，每孔加入50μL酶標(biāo)記抗體。輕輕震蕩混勻，37℃孵育30分鐘。6. 洗滌同步驟4，洗滌5次。7. 顯色每孔加入50μL底物溶液（TMB），輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。8. 終止每孔加入50μL終止液，輕輕震蕩混勻，此時藍(lán)色立即變?yōu)辄S色。9. 測定在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定各孔的吸光度（OD值）。【結(jié)果計算】以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，或使用酶標(biāo)儀自帶軟件進(jìn)行曲線擬合。根據(jù)樣品的OD值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的[檢測項目名稱]濃度。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制示例：標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/mL）：0, 2, 4, 8, 16, 32對應(yīng)的OD值：[示例值，如：0.100, 0.250, 0.480, 0.850, 1.400, 2.100]建議采用四參數(shù) logistic 曲線（4-PL）擬合，相關(guān)系數(shù)R2應(yīng)≥0.99。【檢測方法的局限性】本試劑盒僅供科研使用，結(jié)果不能作為臨床診斷的唯一依據(jù)。樣本處理不當(dāng)可能導(dǎo)致結(jié)果偏差，應(yīng)嚴(yán)格按照說明書操作。高濃度樣本可能存在hook效應(yīng)，建議對OD值異常高的樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新檢測?！咀⒁馐马棥繉嶒炃罢堊屑?xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行。所有試劑需在有效期內(nèi)使用，不同批次的試劑不得混用。操作時需戴手套、口罩，避免試劑接觸皮膚和黏膜。TMB底物溶液有潛在致癌性，終止液為強酸，操作時需小心，若不慎接觸，立即用大量清水沖洗。實驗結(jié)束后，廢棄物應(yīng)按照生物安全規(guī)定處理?！緲?biāo)準(zhǔn)品稀釋方法】1. 高濃度標(biāo)準(zhǔn)品（如32 ng/mL）為母液，無需稀釋。2. 取50μL 32 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品加入50μL樣品稀釋液中，混勻，得到16 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品。3. 取50μL 16 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品加入50μL樣品稀釋液中，混勻，得到8 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品。4. 依次類推，稀釋得到4 ng/mL、2 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品。5. 0 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品即為樣品稀釋液?！竞V瑪實驗服務(wù)代測】ELISA實驗代測ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實驗）代測是科研和臨床檢測中＊常用的外包服務(wù)之一，基于抗原抗體特異性結(jié)合原理，可對生物樣本中的微量物質(zhì)進(jìn)行定量或定性檢測。一、按檢測靶標(biāo)類型分類1. 細(xì)胞因子與趨化因子類這是科研中需求量＊大的代測類別，主要用于免疫、炎癥、腫瘤、心血管等研究白細(xì)胞介素家族：IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23 等干擾素家族：IFN-α、IFN-β、IFN-γ腫瘤壞死因子家族：TNF-α、TNF-β、LTA趨化因子家族：CCL2 (MCP-1)、CCL5 (RANTES)、CXCL8 (IL-8)、CXCL10 (IP-10)生長因子家族：EGF、VEGF、FGF、PDGF、TGF-β、NGF、IGF-12. 炎癥與免疫相關(guān)標(biāo)志物急性期反應(yīng)蛋白：CRP、SAA、PCT、纖維蛋白原補體系統(tǒng)：C3、C4、C5a、C1q免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM、IgE、IgD 及各亞型免疫細(xì)胞表面標(biāo)志物：sCD4、sCD8、sCD14、sCD1633. 激素與內(nèi)分泌相關(guān)垂體激素：FSH、LH、TSH、GH、PRL、ACTH甲狀腺激素：T3、T4、FT3、FT4、TSH性激素：雌二醇 (E2)、孕酮 (P)、睪酮 (T)、雌酮、脫氫表雄酮代謝激素：胰島素、胰高血糖素、瘦素 (Leptin)、脂聯(lián)素 (Adiponectin)、抵抗素應(yīng)激激素：皮質(zhì)醇、腎上腺素、去甲腎上腺素4. 腫瘤標(biāo)志物廣譜腫瘤標(biāo)志物：CEA、AFP、CA125、CA19-9、CA15-3、CA72-4器官特異性標(biāo)志物：PSA (前列腺)、NSE (神經(jīng)內(nèi)分泌)、CYFRA21-1 (肺癌)、SCC (鱗狀細(xì)胞癌)腫瘤相關(guān)蛋白：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、VEGF、EGFR5. 自身抗體類抗核抗體譜：ANA、抗 ds-DNA、抗 Sm、抗 SSA、抗 SSB類風(fēng)濕相關(guān)：RF、抗 CCP、抗角蛋白抗體血管炎相關(guān)：ANCA (c-ANCA、p-ANCA)、抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體其他自身抗體：抗甲狀腺抗體 (TPOAb、TgAb)、抗胰島素抗體、抗磷脂抗體6. 心血管疾病相關(guān)標(biāo)志物心肌損傷標(biāo)志物：cTnI、cTnT、CK-MB、Myoglobin心功能標(biāo)志物：BNP、NT-proBNP動脈粥樣硬化標(biāo)志物：ox-LDL、Lp-PLA2、hs-CRP、同型半胱氨酸凝血與纖溶：D - 二聚體、FDP、PAI-1、t-PA7. 神經(jīng)科學(xué)相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)：5 - 羥色胺、多巴胺、去甲腎上腺素、乙酰膽堿、γ- 氨基丁酸神經(jīng)退行性標(biāo)志物：Aβ1-40、Aβ1-42、Tau 蛋白、磷酸化 Tau 蛋白神經(jīng)炎癥標(biāo)志物：GFAP、S100B、NSE、MBP8. 其他常見靶標(biāo)代謝物：葡萄糖、膽固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐病原體抗原 / 抗體：乙肝五項、丙肝抗體、梅毒抗體、HIV 抗體、新冠病毒抗原 / 抗體藥物濃度：抗生素、化療藥物、免疫抑制劑血藥濃度qPCR實驗代測實驗四步走：1. 提取RNA → 記得防RNase污染！用Trizol＊穩(wěn)2.逆轉(zhuǎn)錄 → 把RNA變成cDNA，這是關(guān)鍵一步3.上機運行 → 探針法更特異，染料法更便宜4.數(shù)據(jù)分析 → 用 2^(-ΔΔCt) 公式算相對表達(dá)量！ 血淚注意事項：引物Tm值＊好在60-64℃哦！染料法(如SYBR Green)一定要看熔解曲線，排除非特異性擴增！基線和閾值設(shè)置別亂調(diào)～所有操作都要防核酸酶污染！
大鼠（Rat）腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白101（TSG-101）ELISA檢測試劑盒?產(chǎn)品貨號：DM-F305產(chǎn)品規(guī)格：96T / 48T?ELISA 試劑盒的全稱是酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Kit），是基于酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)研發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)化科研檢測工具，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、食品安全等領(lǐng)域的抗原、抗體、激素、細(xì)胞因子等生物分子的定性或定量檢測。?原理利用抗原與抗體的特異性免疫結(jié)合反應(yīng)，結(jié)合酶對底物的高效催化顯色作用，將免疫反應(yīng)的信號放大。通過檢測顯色后的吸光度值（OD 值），與標(biāo)準(zhǔn)品濃度曲線對比，即可計算出樣本中目標(biāo)物質(zhì)的含量。?主要包含?4?類核心反應(yīng)環(huán)節(jié)：①?抗原或抗體的固相化包被②?樣本與包被物的特異性結(jié)合③?酶標(biāo)二抗的結(jié)合④?底物顯色與信號檢測?試劑盒組件（DUMABIO?ELISA?試劑盒為即開即用型套裝，包含以下標(biāo)準(zhǔn)化組分，無需用戶自行配制核心試劑）組件名稱組件功效微孔酶標(biāo)板預(yù)包被有特異性抗原或抗體的微量反應(yīng)板標(biāo)準(zhǔn)品已知濃度的目標(biāo)物質(zhì)，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線酶標(biāo)記物標(biāo)記有辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）的特異性抗體顯色劑與酶反應(yīng)后可產(chǎn)生顯色信號的試劑（如 TMB 底物液）終止液終止酶促反應(yīng)，使顯色穩(wěn)定洗滌液、封閉液、樣本稀釋液輔助完成免疫反應(yīng)的配套試劑封板膜、自封袋輔助耗材，保障試劑穩(wěn)定性、實驗準(zhǔn)確性和操作規(guī)范性說明書請嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行實驗操作??DUMABIO ELISA產(chǎn)品優(yōu)勢特異性強：抗原抗體的特異性結(jié)合，可有效避免交叉反應(yīng)靈敏度高：酶信號放大作用，可檢測到 pg/mL 級別的微量物質(zhì)操作便捷：標(biāo)準(zhǔn)化試劑與90分鐘一步法操作流程，無需復(fù)雜儀器（僅需酶標(biāo)儀）高通量檢測：96 孔板設(shè)計可同時檢測多個樣本，適合批量實驗免費代測：專業(yè)實驗室代測服務(wù)高效省時?
大鼠（Rat）CD63分子（CD63）ELISA檢測試劑盒?產(chǎn)品貨號：DM-F287產(chǎn)品規(guī)格：96T / 48T?ELISA 試劑盒的全稱是酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Kit），是基于酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)研發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)化科研檢測工具，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、食品安全等領(lǐng)域的抗原、抗體、激素、細(xì)胞因子等生物分子的定性或定量檢測。?原理利用抗原與抗體的特異性免疫結(jié)合反應(yīng)，結(jié)合酶對底物的高效催化顯色作用，將免疫反應(yīng)的信號放大。通過檢測顯色后的吸光度值（OD 值），與標(biāo)準(zhǔn)品濃度曲線對比，即可計算出樣本中目標(biāo)物質(zhì)的含量。?主要包含?4?類核心反應(yīng)環(huán)節(jié)：①?抗原或抗體的固相化包被②?樣本與包被物的特異性結(jié)合③?酶標(biāo)二抗的結(jié)合④?底物顯色與信號檢測?試劑盒組件（DUMABIO?ELISA?試劑盒為即開即用型套裝，包含以下標(biāo)準(zhǔn)化組分，無需用戶自行配制核心試劑）組件名稱組件功效微孔酶標(biāo)板預(yù)包被有特異性抗原或抗體的微量反應(yīng)板標(biāo)準(zhǔn)品已知濃度的目標(biāo)物質(zhì)，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線酶標(biāo)記物標(biāo)記有辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）的特異性抗體顯色劑與酶反應(yīng)后可產(chǎn)生顯色信號的試劑（如 TMB 底物液）終止液終止酶促反應(yīng)，使顯色穩(wěn)定洗滌液、封閉液、樣本稀釋液輔助完成免疫反應(yīng)的配套試劑封板膜、自封袋輔助耗材，保障試劑穩(wěn)定性、實驗準(zhǔn)確性和操作規(guī)范性說明書請嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行實驗操作??DUMABIO ELISA產(chǎn)品優(yōu)勢特異性強：抗原抗體的特異性結(jié)合，可有效避免交叉反應(yīng)靈敏度高：酶信號放大作用，可檢測到 pg/mL 級別的微量物質(zhì)操作便捷：標(biāo)準(zhǔn)化試劑與90分鐘一步法操作流程，無需復(fù)雜儀器（僅需酶標(biāo)儀）高通量檢測：96 孔板設(shè)計可同時檢測多個樣本，適合批量實驗免費代測：專業(yè)實驗室代測服務(wù)高效省時?
大鼠（Rat）ⅡA分泌型磷脂酶A2(sPLA2-IIA)ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品貨號：DM-F285產(chǎn)品規(guī)格：[48/96T]ELISA檢測試劑盒的原理酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）是一種將抗原 - 抗體特異性免疫反應(yīng)與酶催化底物的化學(xué)顯色反應(yīng)相結(jié)合的高靈敏度、高特異性免疫分析技術(shù)。它通過將不可見的免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可定量的顯色信號，實現(xiàn)對樣本中極微量目標(biāo)物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、激素、抗體、病原體抗原等）的定性或定量檢測。核心原理ELISA 的核心原理基于三個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，所有類型的 ELISA 都遵循這一基本邏輯：固相包被：將已知的抗原或抗體通過物理吸附的方式牢固固定于固相載體（通常為聚苯乙烯 96 孔微孔板）表面，并保持其免疫活性。特異性結(jié)合與酶標(biāo)記：利用抗原與抗體之間 "鎖鑰式" 的高度特異性識別與結(jié)合能力，使樣本中的目標(biāo)分析物與固相上的對應(yīng)配體發(fā)生反應(yīng)。同時，將酶（＊常用的是辣根過氧化物酶 HRP 和堿性磷酸酶 AP）標(biāo)記在抗體或抗原上，形成酶標(biāo)結(jié)合物。該結(jié)合物既能與相應(yīng)的抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，又保留酶的催化活性。顯色與定量：在反應(yīng)體系中，結(jié)合在固相上的酶量與樣本中待測物含量成比例。加入酶特異性底物后，底物被酶催化生成有色產(chǎn)物。通過酶標(biāo)儀測定吸光度（OD 值），即可根據(jù)顏色深淺判斷待測物的濃度。酶的高效催化作用可極大放大信號，使該方法具備極高的檢測靈敏度，可檢測 ng 甚至 pg 級別的微量物質(zhì)。主要類型及原理對比根據(jù)實驗設(shè)計和檢測對象的不同，ELISA 主要分為以下四種類型：1. 直接法 ELISA原理：將抗原直接包被在固相載體上，加入酶標(biāo)記的特異性一抗進(jìn)行孵育，結(jié)合后酶催化底物反應(yīng)顯色。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：操作步驟少，耗時短，避免了二抗可能引起的交叉反應(yīng)。缺點：信號無放大作用導(dǎo)致靈敏度較低；每種待測物均需制備特異性酶標(biāo)抗體，靈活性差；易因非特異性吸附導(dǎo)致背景較高。應(yīng)用場景：病原體快速定性檢測、純化蛋白定量、抗體篩選和抗原表位作圖。2. 間接法 ELISA原理：將抗原固定于固相載體，先加入非酶標(biāo)一抗與抗原結(jié)合，再加入酶標(biāo)二抗（針對一抗的抗體）進(jìn)行檢測。吸光度值與一抗?jié)舛瘸收嚓P(guān)。優(yōu)點：通過二抗放大信號，靈敏度顯著高于直接法；一種酶標(biāo)二抗可適用于多種同種屬來源的一抗，經(jīng)濟(jì)且靈活。缺點：實驗步驟增多，周期延長；二抗可能與固相抗原發(fā)生非特異性結(jié)合，潛在交叉反應(yīng)風(fēng)險。應(yīng)用場景：主要用于檢測樣本中的抗體，如病原體特異性 IgG/IgM、自身免疫病抗體滴定、過敏診斷等。3. 雙抗體夾心法 ELISA原理：使用兩種分別針對目標(biāo)抗原不同表位的抗體。一種作為 "捕獲抗體" 包被固相，加入樣本后抗原被捕獲；再加入另一種 "檢測抗體"（可直接酶標(biāo)記或通過酶標(biāo)二抗間接檢測），形成 "捕獲抗體 - 抗原 - 檢測抗體" 的三明治復(fù)合物。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：適用于多表位抗原檢測，具有極高的特異性和靈敏度（可達(dá) pg/mL 級），是應(yīng)用＊廣泛的 ELISA 形式。缺點：要求兩種抗體不存在交叉反應(yīng)，且不競爭同一結(jié)合位點，對抗體配對要求高。應(yīng)用場景：細(xì)胞因子檢測（如 IL-6、TNF-α）、腫瘤標(biāo)志物篩查（如 CEA、PSA）、激素水平測定、食品安全中蛋白質(zhì)含量檢測等。4. 競爭法 ELISA原理：將捕獲抗體包被在固相載體上，同時加入樣本中的目標(biāo)抗原和酶標(biāo)抗原，兩者競爭結(jié)合有限的抗體結(jié)合位點。當(dāng)樣本中目標(biāo)抗原濃度升高時，其與捕獲抗體的結(jié)合會擠占酶標(biāo)抗原的結(jié)合空間，＊終催化底物產(chǎn)生的顯色信號強度與目標(biāo)抗原含量呈負(fù)相關(guān)。優(yōu)點：可檢測缺乏多表位的小分子物質(zhì)（如激素、藥物代謝物、農(nóng)藥殘留）或半抗原；競爭模型天然規(guī)避復(fù)雜樣本中高豐度蛋白的干擾。缺點：靈敏度相對較低；抗原結(jié)構(gòu)類似物易引發(fā)假陰性 / 陽性信號；反向標(biāo)曲增加數(shù)據(jù)分析復(fù)雜度。應(yīng)用場景：小分子激素檢測、藥物血藥濃度監(jiān)測、農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查等?；緦嶒灢襟E以＊常用的雙抗體夾心法為例，ELISA 實驗的基本流程如下：包被：將捕獲抗體用包被緩沖液稀釋至合適濃度，每孔加入 100μL，4℃孵育過夜或 37℃孵育 2 小時。封閉：棄去孔內(nèi)液體，洗滌后每孔加入 200μL 封閉液（如 1% BSA），37℃孵育 1 小時，阻斷未結(jié)合包被物的空白位點。加樣：加入稀釋后的樣本和一系列濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品，每孔 100μL，37℃孵育 1-2 小時。加檢測抗體：洗滌后加入酶標(biāo)檢測抗體，37℃孵育 1 小時。顯色：洗滌后每孔加入底物 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 15-20 分鐘。終止反應(yīng)：每孔加入 50μL 終止液（如 2mol/L H?SO?），此時顏色不再變化。讀數(shù)與分析：在終止反應(yīng)后 15 分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定各孔吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算待測樣本濃度。技術(shù)優(yōu)勢與應(yīng)用領(lǐng)域主要優(yōu)勢高靈敏度：酶的催化作用放大了免疫反應(yīng)信號，可檢測 pg 級別的微量物質(zhì)強特異性：基于抗原抗體的高度特異性結(jié)合，交叉反應(yīng)率低操作簡便：流程標(biāo)準(zhǔn)化，易于掌握，適合批量檢測成本相對較低：相比質(zhì)譜等高端技術(shù)更經(jīng)濟(jì)實用可定量分析：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線實現(xiàn)精確的定量檢測廣泛應(yīng)用ELISA 技術(shù)憑借其優(yōu)異的性能，已成為生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中不可或缺的工具，廣泛應(yīng)用于：臨床醫(yī)學(xué)診斷：感染性疾病病原體抗原 / 抗體檢測、腫瘤標(biāo)志物定量、激素水平測定、治療藥物監(jiān)測等基礎(chǔ)研究：細(xì)胞因子分泌水平分析、蛋白質(zhì)表達(dá)定量、疫苗效價評估等食品安全監(jiān)測：農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查、抗生素殘留檢測等畜牧獸醫(yī)與動物檢疫：動物疫病診斷、畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測等環(huán)境監(jiān)測：環(huán)境污染物檢測、水質(zhì)分析等樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標(biāo)儀（450nm）2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。生化試劑盒與ELISA試劑盒的核心區(qū)別ELISA試劑盒免費代測服務(wù)詳解上海篤瑪生物免費代測服務(wù)上海篤瑪生物科技有限公司為購買其 DUMABIO 品牌 ELISA 試劑盒的客戶提供免費代測服務(wù)，這是該公司的核心增值服務(wù)之一。服務(wù)內(nèi)容1.支持雙抗體夾心法檢測抗原、間接法檢測抗體等多種 ELISA 技術(shù)2.可檢測血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、胸腹水、腦脊液等多種標(biāo)本類型服務(wù)周期1.一般在收到樣本后的7 個工作日內(nèi)出具實驗報告2.特殊情況可協(xié)商加急服務(wù)交付結(jié)果1.原始 OD 值數(shù)據(jù)2.標(biāo)準(zhǔn)曲線及擬合方程3.樣本濃度計算結(jié)果4.完整的實驗報告5.免費代測基本條件6.樣本質(zhì)量要求：樣本必須新鮮或正確保存，無明顯溶血、脂血或污染7.樣本要求與處理8.樣本體積9.每個檢測孔至少需要100μL樣本體積10.建議按 "檢測孔數(shù) ×120μL" 準(zhǔn)備，預(yù)留一定余量11.如需做復(fù)孔檢測，樣本量需加倍保存與運輸1.樣本處理后應(yīng)分裝密封保存，避免反復(fù)凍融2.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。3.有效期：6個月4.郵寄時必須使用干冰運輸，確保樣本在運輸過程中保持冷凍狀態(tài)標(biāo)記要求在樣本管蓋或管壁清晰標(biāo)記樣本編號管口用封口膜封好，防止污染和泄漏隨樣本提供詳細(xì)的代測信息表，包括：標(biāo)本編號、所測項目、是否做復(fù)孔、實驗后標(biāo)本是否寄回代測服務(wù)流程咨詢與訂購：聯(lián)系客服確認(rèn)所需檢測指標(biāo)，訂購對應(yīng) ELISA 試劑盒樣本準(zhǔn)備：按照要求收集、處理和保存樣本樣本寄送：將樣本和代測信息表一起寄送至公司實驗室實驗檢測：專業(yè)技術(shù)人員按照標(biāo)準(zhǔn) SOP 流程進(jìn)行實驗操作數(shù)據(jù)分析：對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析，生成標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣本濃度報告交付：通過郵件或在線方式發(fā)送完整的實驗報告技術(shù)支持：提供后續(xù)的數(shù)據(jù)解讀和實驗咨詢服務(wù)注意事項傳染性樣本：為保證實驗室人員安全，不接受具有傳染性疾病的樣本樣本責(zé)任：客戶需對所提供樣本的真實性和合法性負(fù)責(zé)實驗失敗處理：如因試劑盒質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，公司將免費重新檢測；如因樣本質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，需重新提供樣本并可能收取相應(yīng)費用數(shù)據(jù)保密：公司對客戶的實驗數(shù)據(jù)和樣本信息嚴(yán)格保密免責(zé)聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。
大鼠（Rat）α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品貨號：DM-F286產(chǎn)品規(guī)格：[48/96T]ELISA檢測試劑盒的原理酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）是一種將抗原 - 抗體特異性免疫反應(yīng)與酶催化底物的化學(xué)顯色反應(yīng)相結(jié)合的高靈敏度、高特異性免疫分析技術(shù)。它通過將不可見的免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可定量的顯色信號，實現(xiàn)對樣本中極微量目標(biāo)物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、激素、抗體、病原體抗原等）的定性或定量檢測。核心原理ELISA 的核心原理基于三個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，所有類型的 ELISA 都遵循這一基本邏輯：固相包被：將已知的抗原或抗體通過物理吸附的方式牢固固定于固相載體（通常為聚苯乙烯 96 孔微孔板）表面，并保持其免疫活性。特異性結(jié)合與酶標(biāo)記：利用抗原與抗體之間 "鎖鑰式" 的高度特異性識別與結(jié)合能力，使樣本中的目標(biāo)分析物與固相上的對應(yīng)配體發(fā)生反應(yīng)。同時，將酶（＊常用的是辣根過氧化物酶 HRP 和堿性磷酸酶 AP）標(biāo)記在抗體或抗原上，形成酶標(biāo)結(jié)合物。該結(jié)合物既能與相應(yīng)的抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，又保留酶的催化活性。顯色與定量：在反應(yīng)體系中，結(jié)合在固相上的酶量與樣本中待測物含量成比例。加入酶特異性底物后，底物被酶催化生成有色產(chǎn)物。通過酶標(biāo)儀測定吸光度（OD 值），即可根據(jù)顏色深淺判斷待測物的濃度。酶的高效催化作用可極大放大信號，使該方法具備極高的檢測靈敏度，可檢測 ng 甚至 pg 級別的微量物質(zhì)。主要類型及原理對比根據(jù)實驗設(shè)計和檢測對象的不同，ELISA 主要分為以下四種類型：1. 直接法 ELISA原理：將抗原直接包被在固相載體上，加入酶標(biāo)記的特異性一抗進(jìn)行孵育，結(jié)合后酶催化底物反應(yīng)顯色。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：操作步驟少，耗時短，避免了二抗可能引起的交叉反應(yīng)。缺點：信號無放大作用導(dǎo)致靈敏度較低；每種待測物均需制備特異性酶標(biāo)抗體，靈活性差；易因非特異性吸附導(dǎo)致背景較高。應(yīng)用場景：病原體快速定性檢測、純化蛋白定量、抗體篩選和抗原表位作圖。2. 間接法 ELISA原理：將抗原固定于固相載體，先加入非酶標(biāo)一抗與抗原結(jié)合，再加入酶標(biāo)二抗（針對一抗的抗體）進(jìn)行檢測。吸光度值與一抗?jié)舛瘸收嚓P(guān)。優(yōu)點：通過二抗放大信號，靈敏度顯著高于直接法；一種酶標(biāo)二抗可適用于多種同種屬來源的一抗，經(jīng)濟(jì)且靈活。缺點：實驗步驟增多，周期延長；二抗可能與固相抗原發(fā)生非特異性結(jié)合，潛在交叉反應(yīng)風(fēng)險。應(yīng)用場景：主要用于檢測樣本中的抗體，如病原體特異性 IgG/IgM、自身免疫病抗體滴定、過敏診斷等。3. 雙抗體夾心法 ELISA原理：使用兩種分別針對目標(biāo)抗原不同表位的抗體。一種作為 "捕獲抗體" 包被固相，加入樣本后抗原被捕獲；再加入另一種 "檢測抗體"（可直接酶標(biāo)記或通過酶標(biāo)二抗間接檢測），形成 "捕獲抗體 - 抗原 - 檢測抗體" 的三明治復(fù)合物。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：適用于多表位抗原檢測，具有極高的特異性和靈敏度（可達(dá) pg/mL 級），是應(yīng)用＊廣泛的 ELISA 形式。缺點：要求兩種抗體不存在交叉反應(yīng)，且不競爭同一結(jié)合位點，對抗體配對要求高。應(yīng)用場景：細(xì)胞因子檢測（如 IL-6、TNF-α）、腫瘤標(biāo)志物篩查（如 CEA、PSA）、激素水平測定、食品安全中蛋白質(zhì)含量檢測等。4. 競爭法 ELISA原理：將捕獲抗體包被在固相載體上，同時加入樣本中的目標(biāo)抗原和酶標(biāo)抗原，兩者競爭結(jié)合有限的抗體結(jié)合位點。當(dāng)樣本中目標(biāo)抗原濃度升高時，其與捕獲抗體的結(jié)合會擠占酶標(biāo)抗原的結(jié)合空間，＊終催化底物產(chǎn)生的顯色信號強度與目標(biāo)抗原含量呈負(fù)相關(guān)。優(yōu)點：可檢測缺乏多表位的小分子物質(zhì)（如激素、藥物代謝物、農(nóng)藥殘留）或半抗原；競爭模型天然規(guī)避復(fù)雜樣本中高豐度蛋白的干擾。缺點：靈敏度相對較低；抗原結(jié)構(gòu)類似物易引發(fā)假陰性 / 陽性信號；反向標(biāo)曲增加數(shù)據(jù)分析復(fù)雜度。應(yīng)用場景：小分子激素檢測、藥物血藥濃度監(jiān)測、農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查等。基本實驗步驟以＊常用的雙抗體夾心法為例，ELISA 實驗的基本流程如下：包被：將捕獲抗體用包被緩沖液稀釋至合適濃度，每孔加入 100μL，4℃孵育過夜或 37℃孵育 2 小時。封閉：棄去孔內(nèi)液體，洗滌后每孔加入 200μL 封閉液（如 1% BSA），37℃孵育 1 小時，阻斷未結(jié)合包被物的空白位點。加樣：加入稀釋后的樣本和一系列濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品，每孔 100μL，37℃孵育 1-2 小時。加檢測抗體：洗滌后加入酶標(biāo)檢測抗體，37℃孵育 1 小時。顯色：洗滌后每孔加入底物 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 15-20 分鐘。終止反應(yīng)：每孔加入 50μL 終止液（如 2mol/L H?SO?），此時顏色不再變化。讀數(shù)與分析：在終止反應(yīng)后 15 分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定各孔吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算待測樣本濃度。技術(shù)優(yōu)勢與應(yīng)用領(lǐng)域主要優(yōu)勢高靈敏度：酶的催化作用放大了免疫反應(yīng)信號，可檢測 pg 級別的微量物質(zhì)強特異性：基于抗原抗體的高度特異性結(jié)合，交叉反應(yīng)率低操作簡便：流程標(biāo)準(zhǔn)化，易于掌握，適合批量檢測成本相對較低：相比質(zhì)譜等高端技術(shù)更經(jīng)濟(jì)實用可定量分析：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線實現(xiàn)精確的定量檢測廣泛應(yīng)用ELISA 技術(shù)憑借其優(yōu)異的性能，已成為生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中不可或缺的工具，廣泛應(yīng)用于：臨床醫(yī)學(xué)診斷：感染性疾病病原體抗原 / 抗體檢測、腫瘤標(biāo)志物定量、激素水平測定、治療藥物監(jiān)測等基礎(chǔ)研究：細(xì)胞因子分泌水平分析、蛋白質(zhì)表達(dá)定量、疫苗效價評估等食品安全監(jiān)測：農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查、抗生素殘留檢測等畜牧獸醫(yī)與動物檢疫：動物疫病診斷、畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測等環(huán)境監(jiān)測：環(huán)境污染物檢測、水質(zhì)分析等樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標(biāo)儀（450nm）2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。生化試劑盒與ELISA試劑盒的核心區(qū)別ELISA試劑盒免費代測服務(wù)詳解上海篤瑪生物免費代測服務(wù)上海篤瑪生物科技有限公司為購買其 DUMABIO 品牌 ELISA 試劑盒的客戶提供免費代測服務(wù)，這是該公司的核心增值服務(wù)之一。服務(wù)內(nèi)容1.支持雙抗體夾心法檢測抗原、間接法檢測抗體等多種 ELISA 技術(shù)2.可檢測血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、胸腹水、腦脊液等多種標(biāo)本類型服務(wù)周期1.一般在收到樣本后的7 個工作日內(nèi)出具實驗報告2.特殊情況可協(xié)商加急服務(wù)交付結(jié)果1.原始 OD 值數(shù)據(jù)2.標(biāo)準(zhǔn)曲線及擬合方程3.樣本濃度計算結(jié)果4.完整的實驗報告5.免費代測基本條件6.樣本質(zhì)量要求：樣本必須新鮮或正確保存，無明顯溶血、脂血或污染7.樣本要求與處理8.樣本體積9.每個檢測孔至少需要100μL樣本體積10.建議按 "檢測孔數(shù) ×120μL" 準(zhǔn)備，預(yù)留一定余量11.如需做復(fù)孔檢測，樣本量需加倍保存與運輸1.樣本處理后應(yīng)分裝密封保存，避免反復(fù)凍融2.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。3.有效期：6個月4.郵寄時必須使用干冰運輸，確保樣本在運輸過程中保持冷凍狀態(tài)標(biāo)記要求在樣本管蓋或管壁清晰標(biāo)記樣本編號管口用封口膜封好，防止污染和泄漏隨樣本提供詳細(xì)的代測信息表，包括：標(biāo)本編號、所測項目、是否做復(fù)孔、實驗后標(biāo)本是否寄回代測服務(wù)流程咨詢與訂購：聯(lián)系客服確認(rèn)所需檢測指標(biāo)，訂購對應(yīng) ELISA 試劑盒樣本準(zhǔn)備：按照要求收集、處理和保存樣本樣本寄送：將樣本和代測信息表一起寄送至公司實驗室實驗檢測：專業(yè)技術(shù)人員按照標(biāo)準(zhǔn) SOP 流程進(jìn)行實驗操作數(shù)據(jù)分析：對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析，生成標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣本濃度報告交付：通過郵件或在線方式發(fā)送完整的實驗報告技術(shù)支持：提供后續(xù)的數(shù)據(jù)解讀和實驗咨詢服務(wù)注意事項傳染性樣本：為保證實驗室人員安全，不接受具有傳染性疾病的樣本樣本責(zé)任：客戶需對所提供樣本的真實性和合法性負(fù)責(zé)實驗失敗處理：如因試劑盒質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，公司將免費重新檢測；如因樣本質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，需重新提供樣本并可能收取相應(yīng)費用數(shù)據(jù)保密：公司對客戶的實驗數(shù)據(jù)和樣本信息嚴(yán)格保密免責(zé)聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。
大鼠（Rat）I型膠原蛋白（ColⅠ）ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品貨號：DM-F295產(chǎn)品規(guī)格：[48/96T]ELISA檢測試劑盒的原理酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）是一種將抗原 - 抗體特異性免疫反應(yīng)與酶催化底物的化學(xué)顯色反應(yīng)相結(jié)合的高靈敏度、高特異性免疫分析技術(shù)。它通過將不可見的免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可定量的顯色信號，實現(xiàn)對樣本中極微量目標(biāo)物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、激素、抗體、病原體抗原等）的定性或定量檢測。核心原理ELISA 的核心原理基于三個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，所有類型的 ELISA 都遵循這一基本邏輯：固相包被：將已知的抗原或抗體通過物理吸附的方式牢固固定于固相載體（通常為聚苯乙烯 96 孔微孔板）表面，并保持其免疫活性。特異性結(jié)合與酶標(biāo)記：利用抗原與抗體之間 "鎖鑰式" 的高度特異性識別與結(jié)合能力，使樣本中的目標(biāo)分析物與固相上的對應(yīng)配體發(fā)生反應(yīng)。同時，將酶（＊常用的是辣根過氧化物酶 HRP 和堿性磷酸酶 AP）標(biāo)記在抗體或抗原上，形成酶標(biāo)結(jié)合物。該結(jié)合物既能與相應(yīng)的抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，又保留酶的催化活性。顯色與定量：在反應(yīng)體系中，結(jié)合在固相上的酶量與樣本中待測物含量成比例。加入酶特異性底物后，底物被酶催化生成有色產(chǎn)物。通過酶標(biāo)儀測定吸光度（OD 值），即可根據(jù)顏色深淺判斷待測物的濃度。酶的高效催化作用可極大放大信號，使該方法具備極高的檢測靈敏度，可檢測 ng 甚至 pg 級別的微量物質(zhì)。主要類型及原理對比根據(jù)實驗設(shè)計和檢測對象的不同，ELISA 主要分為以下四種類型：1. 直接法 ELISA原理：將抗原直接包被在固相載體上，加入酶標(biāo)記的特異性一抗進(jìn)行孵育，結(jié)合后酶催化底物反應(yīng)顯色。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：操作步驟少，耗時短，避免了二抗可能引起的交叉反應(yīng)。缺點：信號無放大作用導(dǎo)致靈敏度較低；每種待測物均需制備特異性酶標(biāo)抗體，靈活性差；易因非特異性吸附導(dǎo)致背景較高。應(yīng)用場景：病原體快速定性檢測、純化蛋白定量、抗體篩選和抗原表位作圖。2. 間接法 ELISA原理：將抗原固定于固相載體，先加入非酶標(biāo)一抗與抗原結(jié)合，再加入酶標(biāo)二抗（針對一抗的抗體）進(jìn)行檢測。吸光度值與一抗?jié)舛瘸收嚓P(guān)。優(yōu)點：通過二抗放大信號，靈敏度顯著高于直接法；一種酶標(biāo)二抗可適用于多種同種屬來源的一抗，經(jīng)濟(jì)且靈活。缺點：實驗步驟增多，周期延長；二抗可能與固相抗原發(fā)生非特異性結(jié)合，潛在交叉反應(yīng)風(fēng)險。應(yīng)用場景：主要用于檢測樣本中的抗體，如病原體特異性 IgG/IgM、自身免疫病抗體滴定、過敏診斷等。3. 雙抗體夾心法 ELISA原理：使用兩種分別針對目標(biāo)抗原不同表位的抗體。一種作為 "捕獲抗體" 包被固相，加入樣本后抗原被捕獲；再加入另一種 "檢測抗體"（可直接酶標(biāo)記或通過酶標(biāo)二抗間接檢測），形成 "捕獲抗體 - 抗原 - 檢測抗體" 的三明治復(fù)合物。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：適用于多表位抗原檢測，具有極高的特異性和靈敏度（可達(dá) pg/mL 級），是應(yīng)用＊廣泛的 ELISA 形式。缺點：要求兩種抗體不存在交叉反應(yīng)，且不競爭同一結(jié)合位點，對抗體配對要求高。應(yīng)用場景：細(xì)胞因子檢測（如 IL-6、TNF-α）、腫瘤標(biāo)志物篩查（如 CEA、PSA）、激素水平測定、食品安全中蛋白質(zhì)含量檢測等。4. 競爭法 ELISA原理：將捕獲抗體包被在固相載體上，同時加入樣本中的目標(biāo)抗原和酶標(biāo)抗原，兩者競爭結(jié)合有限的抗體結(jié)合位點。當(dāng)樣本中目標(biāo)抗原濃度升高時，其與捕獲抗體的結(jié)合會擠占酶標(biāo)抗原的結(jié)合空間，＊終催化底物產(chǎn)生的顯色信號強度與目標(biāo)抗原含量呈負(fù)相關(guān)。優(yōu)點：可檢測缺乏多表位的小分子物質(zhì)（如激素、藥物代謝物、農(nóng)藥殘留）或半抗原；競爭模型天然規(guī)避復(fù)雜樣本中高豐度蛋白的干擾。缺點：靈敏度相對較低；抗原結(jié)構(gòu)類似物易引發(fā)假陰性 / 陽性信號；反向標(biāo)曲增加數(shù)據(jù)分析復(fù)雜度。應(yīng)用場景：小分子激素檢測、藥物血藥濃度監(jiān)測、農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查等?；緦嶒灢襟E以＊常用的雙抗體夾心法為例，ELISA 實驗的基本流程如下：包被：將捕獲抗體用包被緩沖液稀釋至合適濃度，每孔加入 100μL，4℃孵育過夜或 37℃孵育 2 小時。封閉：棄去孔內(nèi)液體，洗滌后每孔加入 200μL 封閉液（如 1% BSA），37℃孵育 1 小時，阻斷未結(jié)合包被物的空白位點。加樣：加入稀釋后的樣本和一系列濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品，每孔 100μL，37℃孵育 1-2 小時。加檢測抗體：洗滌后加入酶標(biāo)檢測抗體，37℃孵育 1 小時。顯色：洗滌后每孔加入底物 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 15-20 分鐘。終止反應(yīng)：每孔加入 50μL 終止液（如 2mol/L H?SO?），此時顏色不再變化。讀數(shù)與分析：在終止反應(yīng)后 15 分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定各孔吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算待測樣本濃度。技術(shù)優(yōu)勢與應(yīng)用領(lǐng)域主要優(yōu)勢高靈敏度：酶的催化作用放大了免疫反應(yīng)信號，可檢測 pg 級別的微量物質(zhì)強特異性：基于抗原抗體的高度特異性結(jié)合，交叉反應(yīng)率低操作簡便：流程標(biāo)準(zhǔn)化，易于掌握，適合批量檢測成本相對較低：相比質(zhì)譜等高端技術(shù)更經(jīng)濟(jì)實用可定量分析：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線實現(xiàn)精確的定量檢測廣泛應(yīng)用ELISA 技術(shù)憑借其優(yōu)異的性能，已成為生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中不可或缺的工具，廣泛應(yīng)用于：臨床醫(yī)學(xué)診斷：感染性疾病病原體抗原 / 抗體檢測、腫瘤標(biāo)志物定量、激素水平測定、治療藥物監(jiān)測等基礎(chǔ)研究：細(xì)胞因子分泌水平分析、蛋白質(zhì)表達(dá)定量、疫苗效價評估等食品安全監(jiān)測：農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查、抗生素殘留檢測等畜牧獸醫(yī)與動物檢疫：動物疫病診斷、畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測等環(huán)境監(jiān)測：環(huán)境污染物檢測、水質(zhì)分析等樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標(biāo)儀（450nm）2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。生化試劑盒與ELISA試劑盒的核心區(qū)別ELISA試劑盒免費代測服務(wù)詳解上海篤瑪生物免費代測服務(wù)上海篤瑪生物科技有限公司為購買其 DUMABIO 品牌 ELISA 試劑盒的客戶提供免費代測服務(wù)，這是該公司的核心增值服務(wù)之一。服務(wù)內(nèi)容1.支持雙抗體夾心法檢測抗原、間接法檢測抗體等多種 ELISA 技術(shù)2.可檢測血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、胸腹水、腦脊液等多種標(biāo)本類型服務(wù)周期1.一般在收到樣本后的7 個工作日內(nèi)出具實驗報告2.特殊情況可協(xié)商加急服務(wù)交付結(jié)果1.原始 OD 值數(shù)據(jù)2.標(biāo)準(zhǔn)曲線及擬合方程3.樣本濃度計算結(jié)果4.完整的實驗報告5.免費代測基本條件6.樣本質(zhì)量要求：樣本必須新鮮或正確保存，無明顯溶血、脂血或污染7.樣本要求與處理8.樣本體積9.每個檢測孔至少需要100μL樣本體積10.建議按 "檢測孔數(shù) ×120μL" 準(zhǔn)備，預(yù)留一定余量11.如需做復(fù)孔檢測，樣本量需加倍保存與運輸1.樣本處理后應(yīng)分裝密封保存，避免反復(fù)凍融2.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。3.有效期：6個月4.郵寄時必須使用干冰運輸，確保樣本在運輸過程中保持冷凍狀態(tài)標(biāo)記要求在樣本管蓋或管壁清晰標(biāo)記樣本編號管口用封口膜封好，防止污染和泄漏隨樣本提供詳細(xì)的代測信息表，包括：標(biāo)本編號、所測項目、是否做復(fù)孔、實驗后標(biāo)本是否寄回代測服務(wù)流程咨詢與訂購：聯(lián)系客服確認(rèn)所需檢測指標(biāo)，訂購對應(yīng) ELISA 試劑盒樣本準(zhǔn)備：按照要求收集、處理和保存樣本樣本寄送：將樣本和代測信息表一起寄送至公司實驗室實驗檢測：專業(yè)技術(shù)人員按照標(biāo)準(zhǔn) SOP 流程進(jìn)行實驗操作數(shù)據(jù)分析：對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析，生成標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣本濃度報告交付：通過郵件或在線方式發(fā)送完整的實驗報告技術(shù)支持：提供后續(xù)的數(shù)據(jù)解讀和實驗咨詢服務(wù)注意事項傳染性樣本：為保證實驗室人員安全，不接受具有傳染性疾病的樣本樣本責(zé)任：客戶需對所提供樣本的真實性和合法性負(fù)責(zé)實驗失敗處理：如因試劑盒質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，公司將免費重新檢測；如因樣本質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，需重新提供樣本并可能收取相應(yīng)費用數(shù)據(jù)保密：公司對客戶的實驗數(shù)據(jù)和樣本信息嚴(yán)格保密免責(zé)聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。
大鼠（Rat）活性氧簇（ROS）ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品貨號：DM-F310產(chǎn)品規(guī)格：[48/96T]ELISA檢測試劑盒的原理酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）是一種將抗原 - 抗體特異性免疫反應(yīng)與酶催化底物的化學(xué)顯色反應(yīng)相結(jié)合的高靈敏度、高特異性免疫分析技術(shù)。它通過將不可見的免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可定量的顯色信號，實現(xiàn)對樣本中極微量目標(biāo)物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、激素、抗體、病原體抗原等）的定性或定量檢測。核心原理ELISA 的核心原理基于三個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，所有類型的 ELISA 都遵循這一基本邏輯：固相包被：將已知的抗原或抗體通過物理吸附的方式牢固固定于固相載體（通常為聚苯乙烯 96 孔微孔板）表面，并保持其免疫活性。特異性結(jié)合與酶標(biāo)記：利用抗原與抗體之間 "鎖鑰式" 的高度特異性識別與結(jié)合能力，使樣本中的目標(biāo)分析物與固相上的對應(yīng)配體發(fā)生反應(yīng)。同時，將酶（＊常用的是辣根過氧化物酶 HRP 和堿性磷酸酶 AP）標(biāo)記在抗體或抗原上，形成酶標(biāo)結(jié)合物。該結(jié)合物既能與相應(yīng)的抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，又保留酶的催化活性。顯色與定量：在反應(yīng)體系中，結(jié)合在固相上的酶量與樣本中待測物含量成比例。加入酶特異性底物后，底物被酶催化生成有色產(chǎn)物。通過酶標(biāo)儀測定吸光度（OD 值），即可根據(jù)顏色深淺判斷待測物的濃度。酶的高效催化作用可極大放大信號，使該方法具備極高的檢測靈敏度，可檢測 ng 甚至 pg 級別的微量物質(zhì)。主要類型及原理對比根據(jù)實驗設(shè)計和檢測對象的不同，ELISA 主要分為以下四種類型：1. 直接法 ELISA原理：將抗原直接包被在固相載體上，加入酶標(biāo)記的特異性一抗進(jìn)行孵育，結(jié)合后酶催化底物反應(yīng)顯色。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：操作步驟少，耗時短，避免了二抗可能引起的交叉反應(yīng)。缺點：信號無放大作用導(dǎo)致靈敏度較低；每種待測物均需制備特異性酶標(biāo)抗體，靈活性差；易因非特異性吸附導(dǎo)致背景較高。應(yīng)用場景：病原體快速定性檢測、純化蛋白定量、抗體篩選和抗原表位作圖。2. 間接法 ELISA原理：將抗原固定于固相載體，先加入非酶標(biāo)一抗與抗原結(jié)合，再加入酶標(biāo)二抗（針對一抗的抗體）進(jìn)行檢測。吸光度值與一抗?jié)舛瘸收嚓P(guān)。優(yōu)點：通過二抗放大信號，靈敏度顯著高于直接法；一種酶標(biāo)二抗可適用于多種同種屬來源的一抗，經(jīng)濟(jì)且靈活。缺點：實驗步驟增多，周期延長；二抗可能與固相抗原發(fā)生非特異性結(jié)合，潛在交叉反應(yīng)風(fēng)險。應(yīng)用場景：主要用于檢測樣本中的抗體，如病原體特異性 IgG/IgM、自身免疫病抗體滴定、過敏診斷等。3. 雙抗體夾心法 ELISA原理：使用兩種分別針對目標(biāo)抗原不同表位的抗體。一種作為 "捕獲抗體" 包被固相，加入樣本后抗原被捕獲；再加入另一種 "檢測抗體"（可直接酶標(biāo)記或通過酶標(biāo)二抗間接檢測），形成 "捕獲抗體 - 抗原 - 檢測抗體" 的三明治復(fù)合物。吸光度值與抗原濃度呈正相關(guān)。優(yōu)點：適用于多表位抗原檢測，具有極高的特異性和靈敏度（可達(dá) pg/mL 級），是應(yīng)用＊廣泛的 ELISA 形式。缺點：要求兩種抗體不存在交叉反應(yīng)，且不競爭同一結(jié)合位點，對抗體配對要求高。應(yīng)用場景：細(xì)胞因子檢測（如 IL-6、TNF-α）、腫瘤標(biāo)志物篩查（如 CEA、PSA）、激素水平測定、食品安全中蛋白質(zhì)含量檢測等。4. 競爭法 ELISA原理：將捕獲抗體包被在固相載體上，同時加入樣本中的目標(biāo)抗原和酶標(biāo)抗原，兩者競爭結(jié)合有限的抗體結(jié)合位點。當(dāng)樣本中目標(biāo)抗原濃度升高時，其與捕獲抗體的結(jié)合會擠占酶標(biāo)抗原的結(jié)合空間，＊終催化底物產(chǎn)生的顯色信號強度與目標(biāo)抗原含量呈負(fù)相關(guān)。優(yōu)點：可檢測缺乏多表位的小分子物質(zhì)（如激素、藥物代謝物、農(nóng)藥殘留）或半抗原；競爭模型天然規(guī)避復(fù)雜樣本中高豐度蛋白的干擾。缺點：靈敏度相對較低；抗原結(jié)構(gòu)類似物易引發(fā)假陰性 / 陽性信號；反向標(biāo)曲增加數(shù)據(jù)分析復(fù)雜度。應(yīng)用場景：小分子激素檢測、藥物血藥濃度監(jiān)測、農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查等。基本實驗步驟以＊常用的雙抗體夾心法為例，ELISA 實驗的基本流程如下：包被：將捕獲抗體用包被緩沖液稀釋至合適濃度，每孔加入 100μL，4℃孵育過夜或 37℃孵育 2 小時。封閉：棄去孔內(nèi)液體，洗滌后每孔加入 200μL 封閉液（如 1% BSA），37℃孵育 1 小時，阻斷未結(jié)合包被物的空白位點。加樣：加入稀釋后的樣本和一系列濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品，每孔 100μL，37℃孵育 1-2 小時。加檢測抗體：洗滌后加入酶標(biāo)檢測抗體，37℃孵育 1 小時。顯色：洗滌后每孔加入底物 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 15-20 分鐘。終止反應(yīng)：每孔加入 50μL 終止液（如 2mol/L H?SO?），此時顏色不再變化。讀數(shù)與分析：在終止反應(yīng)后 15 分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定各孔吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算待測樣本濃度。技術(shù)優(yōu)勢與應(yīng)用領(lǐng)域主要優(yōu)勢高靈敏度：酶的催化作用放大了免疫反應(yīng)信號，可檢測 pg 級別的微量物質(zhì)強特異性：基于抗原抗體的高度特異性結(jié)合，交叉反應(yīng)率低操作簡便：流程標(biāo)準(zhǔn)化，易于掌握，適合批量檢測成本相對較低：相比質(zhì)譜等高端技術(shù)更經(jīng)濟(jì)實用可定量分析：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線實現(xiàn)精確的定量檢測廣泛應(yīng)用ELISA 技術(shù)憑借其優(yōu)異的性能，已成為生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中不可或缺的工具，廣泛應(yīng)用于：臨床醫(yī)學(xué)診斷：感染性疾病病原體抗原 / 抗體檢測、腫瘤標(biāo)志物定量、激素水平測定、治療藥物監(jiān)測等基礎(chǔ)研究：細(xì)胞因子分泌水平分析、蛋白質(zhì)表達(dá)定量、疫苗效價評估等食品安全監(jiān)測：農(nóng)藥殘留分析、生物毒素篩查、抗生素殘留檢測等畜牧獸醫(yī)與動物檢疫：動物疫病診斷、畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測等環(huán)境監(jiān)測：環(huán)境污染物檢測、水質(zhì)分析等樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標(biāo)儀（450nm）2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。生化試劑盒與ELISA試劑盒的核心區(qū)別ELISA試劑盒免費代測服務(wù)詳解上海篤瑪生物免費代測服務(wù)上海篤瑪生物科技有限公司為購買其 DUMABIO 品牌 ELISA 試劑盒的客戶提供免費代測服務(wù)，這是該公司的核心增值服務(wù)之一。服務(wù)內(nèi)容1.支持雙抗體夾心法檢測抗原、間接法檢測抗體等多種 ELISA 技術(shù)2.可檢測血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、胸腹水、腦脊液等多種標(biāo)本類型服務(wù)周期1.一般在收到樣本后的7 個工作日內(nèi)出具實驗報告2.特殊情況可協(xié)商加急服務(wù)交付結(jié)果1.原始 OD 值數(shù)據(jù)2.標(biāo)準(zhǔn)曲線及擬合方程3.樣本濃度計算結(jié)果4.完整的實驗報告5.免費代測基本條件6.樣本質(zhì)量要求：樣本必須新鮮或正確保存，無明顯溶血、脂血或污染7.樣本要求與處理8.樣本體積9.每個檢測孔至少需要100μL樣本體積10.建議按 "檢測孔數(shù) ×120μL" 準(zhǔn)備，預(yù)留一定余量11.如需做復(fù)孔檢測，樣本量需加倍保存與運輸1.樣本處理后應(yīng)分裝密封保存，避免反復(fù)凍融2.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。3.有效期：6個月4.郵寄時必須使用干冰運輸，確保樣本在運輸過程中保持冷凍狀態(tài)標(biāo)記要求在樣本管蓋或管壁清晰標(biāo)記樣本編號管口用封口膜封好，防止污染和泄漏隨樣本提供詳細(xì)的代測信息表，包括：標(biāo)本編號、所測項目、是否做復(fù)孔、實驗后標(biāo)本是否寄回代測服務(wù)流程咨詢與訂購：聯(lián)系客服確認(rèn)所需檢測指標(biāo)，訂購對應(yīng) ELISA 試劑盒樣本準(zhǔn)備：按照要求收集、處理和保存樣本樣本寄送：將樣本和代測信息表一起寄送至公司實驗室實驗檢測：專業(yè)技術(shù)人員按照標(biāo)準(zhǔn) SOP 流程進(jìn)行實驗操作數(shù)據(jù)分析：對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析，生成標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣本濃度報告交付：通過郵件或在線方式發(fā)送完整的實驗報告技術(shù)支持：提供后續(xù)的數(shù)據(jù)解讀和實驗咨詢服務(wù)注意事項傳染性樣本：為保證實驗室人員安全，不接受具有傳染性疾病的樣本樣本責(zé)任：客戶需對所提供樣本的真實性和合法性負(fù)責(zé)實驗失敗處理：如因試劑盒質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，公司將免費重新檢測；如因樣本質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗失敗，需重新提供樣本并可能收取相應(yīng)費用數(shù)據(jù)保密：公司對客戶的實驗數(shù)據(jù)和樣本信息嚴(yán)格保密免責(zé)聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。
大鼠（Rat）ⅡA分泌型磷脂酶A2(sPLA2-IIA)ELISA檢測試劑盒?產(chǎn)品貨號：DM-F285產(chǎn)品規(guī)格：96T / 48T?ELISA 試劑盒的全稱是酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Kit），是基于酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)研發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)化科研檢測工具，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、食品安全等領(lǐng)域的抗原、抗體、激素、細(xì)胞因子等生物分子的定性或定量檢測。?原理利用抗原與抗體的特異性免疫結(jié)合反應(yīng)，結(jié)合酶對底物的高效催化顯色作用，將免疫反應(yīng)的信號放大。通過檢測顯色后的吸光度值（OD 值），與標(biāo)準(zhǔn)品濃度曲線對比，即可計算出樣本中目標(biāo)物質(zhì)的含量。?主要包含?4?類核心反應(yīng)環(huán)節(jié)：①?抗原或抗體的固相化包被②?樣本與包被物的特異性結(jié)合③?酶標(biāo)二抗的結(jié)合④?底物顯色與信號檢測?試劑盒組件（DUMABIO?ELISA?試劑盒為即開即用型套裝，包含以下標(biāo)準(zhǔn)化組分，無需用戶自行配制核心試劑）組件名稱組件功效微孔酶標(biāo)板預(yù)包被有特異性抗原或抗體的微量反應(yīng)板標(biāo)準(zhǔn)品已知濃度的目標(biāo)物質(zhì)，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線酶標(biāo)記物標(biāo)記有辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）的特異性抗體顯色劑與酶反應(yīng)后可產(chǎn)生顯色信號的試劑（如 TMB 底物液）終止液終止酶促反應(yīng)，使顯色穩(wěn)定洗滌液、封閉液、樣本稀釋液輔助完成免疫反應(yīng)的配套試劑封板膜、自封袋輔助耗材，保障試劑穩(wěn)定性、實驗準(zhǔn)確性和操作規(guī)范性說明書請嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行實驗操作??DUMABIO ELISA產(chǎn)品優(yōu)勢特異性強：抗原抗體的特異性結(jié)合，可有效避免交叉反應(yīng)靈敏度高：酶信號放大作用，可檢測到 pg/mL 級別的微量物質(zhì)操作便捷：標(biāo)準(zhǔn)化試劑與90分鐘一步法操作流程，無需復(fù)雜儀器（僅需酶標(biāo)儀）高通量檢測：96 孔板設(shè)計可同時檢測多個樣本，適合批量實驗免費代測：專業(yè)實驗室代測服務(wù)高效省時?
大鼠（Rat）基質(zhì)金屬蛋白酶3（MMP-3）ELISA檢測試劑盒貨號：DM-F284規(guī)格：96T/48T一、產(chǎn)品概述上海篤瑪生物科技有限公司是專注于生命科學(xué)領(lǐng)域的高科技企業(yè)，秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，致力于為全球科研工作者提供高質(zhì)量的生物學(xué)試劑及解決方案。本試劑盒是公司核心產(chǎn)品線之一，采用自主研發(fā)的高特異性抗體對，基于經(jīng)典的雙抗體夾心法原理構(gòu)建，可＊＊定量檢測樣本中的含量。二、檢測原理本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)：將特異性捕獲抗體預(yù)包被于酶標(biāo)板微孔內(nèi)；實驗時，向微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本，樣本中的檢測指標(biāo)會與包被抗體特異性結(jié)合；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白后，加入生物素標(biāo)記的檢測抗體，形成“包被抗體-目標(biāo)抗原-檢測抗體”的免疫復(fù)合物；隨后加入鏈霉親和素標(biāo)記的辣根過氧化物酶（HRP），生物素與鏈霉親和素發(fā)生特異性結(jié)合，使HRP牢固結(jié)合于免疫復(fù)合物上；＊后加入TMB顯色底物，HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色深淺與樣本中檢測指標(biāo)的濃度呈正相關(guān)。通過酶標(biāo)儀在450nm波長處測定各孔OD值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出待測樣本的濃度。三、試劑盒的組分本試劑盒包含完成一次ELISA檢測所需的全部核心組分，各組分經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)檢，確保實驗可靠性，具體如下：四、樣本處理1. 血清樣本：采集靜脈血后，室溫靜置2-4小時，3000rpm離心10分鐘，收集上層血清，避免溶血，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。2. 血漿樣本：使用抗凝管（EDTA、肝素等）采集血液，采集后立即輕輕顛倒混勻，3000rpm離心10分鐘，收集上層血漿，-20℃或-80℃保存。3. 組織培養(yǎng)上清：細(xì)胞培養(yǎng)完成后，3000rpm離心5分鐘，去除細(xì)胞碎片，收集上清液，-20℃保存。4. 細(xì)胞/組織裂解液：取適量細(xì)胞或組織樣本，加入預(yù)冷的裂解液，冰浴勻漿后，4℃、12000rpm離心15分鐘，收集上清液，-80℃保存。5. 所有樣本在檢測前需恢復(fù)至室溫，震蕩混勻，若有沉淀需再次離心去除，避免影響檢測結(jié)果。根據(jù)樣本實際情況，可使用樣本稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，確保檢測濃度落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。五、實驗步驟1. 試劑準(zhǔn)備：實驗前將所有試劑盒組分及樣本恢復(fù)至室溫（25℃左右），濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋至1×工作液，濃縮檢測抗體、鏈霉親和素-HRP按說明書比例用樣本稀釋液稀釋至工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。2. 加樣：根據(jù)實驗需求確定所需板條數(shù)量，空白孔加入50μL樣本稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入50μL不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品工作液，待測樣本孔加入50μL處理后的樣本（已稀釋的樣本直接加入，未稀釋樣本可根據(jù)情況用樣本稀釋液1:1稀釋后加入）；隨后向所有孔中加入50μL生物素標(biāo)記檢測抗體工作液，輕輕振蕩混勻。3. 孵育：蓋上封板膜，置于37℃恒溫箱中孵育60分鐘。4. 洗滌：小心揭開封板膜，甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿1×洗滌液，靜置30秒后甩去，用吸水紙拍干；重復(fù)此洗滌步驟3次，若使用洗板機，洗滌次數(shù)可增加1次。5. 加酶：每孔加入80μL鏈霉親和素-HRP工作液，輕輕振蕩混勻，蓋上封板膜，37℃孵育30分鐘。6. 洗滌：重復(fù)步驟4的洗滌操作，徹底去除未結(jié)合的酶結(jié)合物。7. 顯色：每孔依次加入50μL顯色液A和50μL顯色液B，輕輕振蕩混勻，蓋上封板膜，37℃避光孵育10分鐘，此時陽性孔會逐漸呈現(xiàn)藍(lán)色。8. 終止：取出酶標(biāo)板，迅速向每孔加入50μL終止液，輕輕振蕩混勻，藍(lán)色會立即轉(zhuǎn)為黃色。9. 檢測：加入終止液后10分鐘內(nèi)，使用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定各孔的OD值（若需校正，可在630nm波長處測定參考OD值，＊終檢測OD值=450nm OD值-630nm OD值）。六、結(jié)果計算1. 首先計算每個標(biāo)準(zhǔn)品、空白孔及樣本孔的平均OD值（復(fù)孔檢測時），空白孔OD值作為陰性對照，用于扣除背景干擾。2. 以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X軸，對數(shù)坐標(biāo)），對應(yīng)的OD值為縱坐標(biāo)（Y軸，線性坐標(biāo)），使用專業(yè)繪圖軟件（如Excel、GraphPad Prism）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程（R2值應(yīng)≥0.99，確保標(biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性）。3. 將扣除背景后的樣本OD值代入回歸方程，計算出樣本中[檢測指標(biāo)]的初步濃度，再根據(jù)樣本的稀釋倍數(shù)計算出樣本的實際濃度。七、試劑盒性能1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。2. 靈敏度：＊低檢測濃度如說明書所示。3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6個月八、儲存與運輸1. 試劑盒未開封時，所有組分需密封置于2~8℃冷藏保存，避免冷凍，其中標(biāo)準(zhǔn)品凍干品可置于-20℃長期保存。2. 試劑盒開封后，預(yù)包被酶標(biāo)板需密封防潮保存，剩余試劑需按原儲存條件保存，避免反復(fù)凍融，開封后建議在1個月內(nèi)用完。3. 運輸過程采用冷鏈運輸（2~8℃），避免高溫、劇烈震蕩，確保產(chǎn)品性能穩(wěn)定。九、注意事項實驗前請仔細(xì)閱讀本說明書，嚴(yán)格按照實驗步驟操作，確保實驗條件（溫度、孵育時間）符合要求。所有試劑使用前需充分混勻，但避免劇烈震蕩產(chǎn)生大量泡沫，以免影響加樣精度。洗滌步驟至關(guān)重要，需確保洗滌充分，避免未結(jié)合的雜蛋白或酶結(jié)合物殘留，導(dǎo)致背景值偏高。顯色反應(yīng)需避光進(jìn)行，終止液加入后應(yīng)立即檢測OD值，避免放置時間過長導(dǎo)致顏色消退，影響檢測結(jié)果。實驗所用樣本、試劑及廢棄物均需按生物安全規(guī)范處理，避免交叉污染。本試劑盒僅用于科研用途，不用于臨床診斷。十、售后服務(wù)上海篤瑪生物科技有限公司擁有專業(yè)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊，為您提供全程技術(shù)支持。如您在產(chǎn)品使用過程中有任何疑問，或?qū)Ξa(chǎn)品質(zhì)量有異議，請及時聯(lián)系我們的技術(shù)顧問，我們將在24小時內(nèi)響應(yīng)，為您提供實驗方案優(yōu)化、問題排查等專業(yè)服務(wù)。
大鼠（Rat）仙臺病毒抗體ELISA檢測試劑盒貨號：DM-F283規(guī)格：96T/48T一、產(chǎn)品概述上海篤瑪生物科技有限公司是專注于生命科學(xué)領(lǐng)域的高科技企業(yè)，秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，致力于為全球科研工作者提供高質(zhì)量的生物學(xué)試劑及解決方案。本試劑盒是公司核心產(chǎn)品線之一，采用自主研發(fā)的高特異性抗體對，基于經(jīng)典的雙抗體夾心法原理構(gòu)建，可＊＊定量檢測樣本中的含量。二、檢測原理本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)：將特異性捕獲抗體預(yù)包被于酶標(biāo)板微孔內(nèi)；實驗時，向微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本，樣本中的檢測指標(biāo)會與包被抗體特異性結(jié)合；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白后，加入生物素標(biāo)記的檢測抗體，形成“包被抗體-目標(biāo)抗原-檢測抗體”的免疫復(fù)合物；隨后加入鏈霉親和素標(biāo)記的辣根過氧化物酶（HRP），生物素與鏈霉親和素發(fā)生特異性結(jié)合，使HRP牢固結(jié)合于免疫復(fù)合物上；＊后加入TMB顯色底物，HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色深淺與樣本中檢測指標(biāo)的濃度呈正相關(guān)。通過酶標(biāo)儀在450nm波長處測定各孔OD值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出待測樣本的濃度。三、試劑盒的組分本試劑盒包含完成一次ELISA檢測所需的全部核心組分，各組分經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)檢，確保實驗可靠性，具體如下：四、樣本處理1. 血清樣本：采集靜脈血后，室溫靜置2-4小時，3000rpm離心10分鐘，收集上層血清，避免溶血，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。2. 血漿樣本：使用抗凝管（EDTA、肝素等）采集血液，采集后立即輕輕顛倒混勻，3000rpm離心10分鐘，收集上層血漿，-20℃或-80℃保存。3. 組織培養(yǎng)上清：細(xì)胞培養(yǎng)完成后，3000rpm離心5分鐘，去除細(xì)胞碎片，收集上清液，-20℃保存。4. 細(xì)胞/組織裂解液：取適量細(xì)胞或組織樣本，加入預(yù)冷的裂解液，冰浴勻漿后，4℃、12000rpm離心15分鐘，收集上清液，-80℃保存。5. 所有樣本在檢測前需恢復(fù)至室溫，震蕩混勻，若有沉淀需再次離心去除，避免影響檢測結(jié)果。根據(jù)樣本實際情況，可使用樣本稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，確保檢測濃度落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。五、實驗步驟1. 試劑準(zhǔn)備：實驗前將所有試劑盒組分及樣本恢復(fù)至室溫（25℃左右），濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋至1×工作液，濃縮檢測抗體、鏈霉親和素-HRP按說明書比例用樣本稀釋液稀釋至工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。2. 加樣：根據(jù)實驗需求確定所需板條數(shù)量，空白孔加入50μL樣本稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入50μL不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品工作液，待測樣本孔加入50μL處理后的樣本（已稀釋的樣本直接加入，未稀釋樣本可根據(jù)情況用樣本稀釋液1:1稀釋后加入）；隨后向所有孔中加入50μL生物素標(biāo)記檢測抗體工作液，輕輕振蕩混勻。3. 孵育：蓋上封板膜，置于37℃恒溫箱中孵育60分鐘。4. 洗滌：小心揭開封板膜，甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿1×洗滌液，靜置30秒后甩去，用吸水紙拍干；重復(fù)此洗滌步驟3次，若使用洗板機，洗滌次數(shù)可增加1次。5. 加酶：每孔加入80μL鏈霉親和素-HRP工作液，輕輕振蕩混勻，蓋上封板膜，37℃孵育30分鐘。6. 洗滌：重復(fù)步驟4的洗滌操作，徹底去除未結(jié)合的酶結(jié)合物。7. 顯色：每孔依次加入50μL顯色液A和50μL顯色液B，輕輕振蕩混勻，蓋上封板膜，37℃避光孵育10分鐘，此時陽性孔會逐漸呈現(xiàn)藍(lán)色。8. 終止：取出酶標(biāo)板，迅速向每孔加入50μL終止液，輕輕振蕩混勻，藍(lán)色會立即轉(zhuǎn)為黃色。9. 檢測：加入終止液后10分鐘內(nèi)，使用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定各孔的OD值（若需校正，可在630nm波長處測定參考OD值，＊終檢測OD值=450nm OD值-630nm OD值）。六、結(jié)果計算1. 首先計算每個標(biāo)準(zhǔn)品、空白孔及樣本孔的平均OD值（復(fù)孔檢測時），空白孔OD值作為陰性對照，用于扣除背景干擾。2. 以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X軸，對數(shù)坐標(biāo)），對應(yīng)的OD值為縱坐標(biāo)（Y軸，線性坐標(biāo)），使用專業(yè)繪圖軟件（如Excel、GraphPad Prism）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程（R2值應(yīng)≥0.99，確保標(biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性）。3. 將扣除背景后的樣本OD值代入回歸方程，計算出樣本中[檢測指標(biāo)]的初步濃度，再根據(jù)樣本的稀釋倍數(shù)計算出樣本的實際濃度。七、試劑盒性能1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。2. 靈敏度：＊低檢測濃度如說明書所示。3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6個月八、儲存與運輸1. 試劑盒未開封時，所有組分需密封置于2~8℃冷藏保存，避免冷凍，其中標(biāo)準(zhǔn)品凍干品可置于-20℃長期保存。2. 試劑盒開封后，預(yù)包被酶標(biāo)板需密封防潮保存，剩余試劑需按原儲存條件保存，避免反復(fù)凍融，開封后建議在1個月內(nèi)用完。3. 運輸過程采用冷鏈運輸（2~8℃），避免高溫、劇烈震蕩，確保產(chǎn)品性能穩(wěn)定。九、注意事項實驗前請仔細(xì)閱讀本說明書，嚴(yán)格按照實驗步驟操作，確保實驗條件（溫度、孵育時間）符合要求。所有試劑使用前需充分混勻，但避免劇烈震蕩產(chǎn)生大量泡沫，以免影響加樣精度。洗滌步驟至關(guān)重要，需確保洗滌充分，避免未結(jié)合的雜蛋白或酶結(jié)合物殘留，導(dǎo)致背景值偏高。顯色反應(yīng)需避光進(jìn)行，終止液加入后應(yīng)立即檢測OD值，避免放置時間過長導(dǎo)致顏色消退，影響檢測結(jié)果。實驗所用樣本、試劑及廢棄物均需按生物安全規(guī)范處理，避免交叉污染。本試劑盒僅用于科研用途，不用于臨床診斷。十、售后服務(wù)上海篤瑪生物科技有限公司擁有專業(yè)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊，為您提供全程技術(shù)支持。如您在產(chǎn)品使用過程中有任何疑問，或?qū)Ξa(chǎn)品質(zhì)量有異議，請及時聯(lián)系我們的技術(shù)顧問，我們將在24小時內(nèi)響應(yīng)，為您提供實驗方案優(yōu)化、問題排查等專業(yè)服務(wù)。
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